盐析（salting out)

• 定义

• 盐析

　　　　向蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐，以破坏蛋白质

　　　的胶体性质，使蛋白质的溶解度降低而从溶液中析出的现

　　　象称为盐析。

　　　　　如利用盐析法结晶肌红蛋白。

• 分段盐析

　　　　由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同，沉淀时

　　所需的pH值与离子强度也不相同，改变盐的浓度与溶液

　　的pH值，可将混合液中的蛋白质分批盐析分开，这种分

　　离蛋白质的方法称为分段盐析法(fractional salting

　　out)。如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白，饱和硫酸铵

　　则可沉淀包括血浆清蛋白在内的全部蛋白质。

• 盐析中常用的中性盐

　　　硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等，其中以硫酸铵最为常用。

• 盐析的原理：

　　　破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素，从而使蛋白质

　发生沉淀

• 破坏了水化层

　　　　　　在高浓度的中性盐溶液中，由于盐离子亲水性

　　　　比蛋白质强，与蛋白质胶粒争夺与水结合，破坏了

　　　　蛋白质的水化层。

• 破坏了电荷

　　　　　　由于盐是强电解质，解离作用强，盐的解离可

　　　　抑制蛋白质弱电解质的解离，使蛋白质带电荷减少。

• 盐析的优点与注意事项

• 优点

　　　　　　不会引起蛋白质变性，经透析去盐后，能得到

　　　　保持生物活性的纯化蛋白质。

• 注意事项

　　　　　　盐析的成败决定于溶液的pH值与离子强度，

　　　　溶液pH值越接近蛋白的等电点，蛋白质越溶液沉淀。

• 盐析的应用---分离蛋白质分子